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        細胞轉染后總是污染,該如何處理?

        發布時間: 2021-11-12  點擊次數: 4296次

        有部分同學在做轉染時,總會有這樣的疑問:細胞養著沒問題,鋪板第二天也沒問題,狀態都很好,然后轉染第二天早上看就污染了,已經重復三次了,回回都是這樣,為啥呀?提的質粒用0.45um濾膜過濾了,別的實驗也用了,沒問題。鋪板剩下的細胞放在t25養了,至今狀態都還很好,只有六孔板里面的污染了,百思不得其解……


        針對這方面問題,以下小編整理出幾個解決方案:

        1、建議換個液看看,看看鏡頭里面的圖片,像不像典型的污染?如不太像典型污染,那如果液體不澄清,背景臟,那可能真的是污染。沒事兒,正常換液,主要操作的時候別與其他細胞一起操作。每次換液的時候,先用雙抗原液清洗一下細胞。就算是細菌污染也不太要緊,一般通過抗生素洗滌和換液頻率都能夠挽救回來。當然了,如果你的細胞不是很珍貴,那你要評估一下有沒有挽救的必要。

        2、可以試試用0.22um濾膜過濾。

        3、轉染如果自己提質粒的話,一般也可不過濾, 用去內毒素大抽試劑盒提,大概每個樣100塊,轉染后也沒問題。

        4、有同學以前做的轉染實驗也是會污染,現在是在完培里面加了1%的雙抗,就不會污染了。整個轉染實驗過程中只有配制轉染試劑時用的純DMEM,其他的給藥和鋪板都用含有雙抗的完培。

        以上就是小編整理出來的幾個答案,希望可以幫到廣大同學,轉染實驗順順利利,發表的文章都能見刊~

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